HPLC : A Practical Guide
Toshihiko T Hanai
Verkauft von AHA-BUCH GmbH, Einbeck, Deutschland
AbeBooks-Verkäufer seit 14. August 2006
Neu - Hardcover
Zustand: Neu
Versand von Deutschland nach USA
Anzahl: 2 verfügbar
In den Warenkorb legenVerkauft von AHA-BUCH GmbH, Einbeck, Deutschland
AbeBooks-Verkäufer seit 14. August 2006
Zustand: Neu
Anzahl: 2 verfügbar
In den Warenkorb legenNeuware - Divided into six chapters, this guide covers basic concepts of HPLC; instrumentation; stationary phase materials; eluents; column efficiency; and the influence of physical chemistry on separations.
Bestandsnummer des Verkäufers 9780854045150
How can these compounds be separated? Why was that method used? These are the two basic questions often asked by students of chromatography. HPLC: A Practical Guide provides the answers, enabling the reader to grasp the concepts of the technique using simple, representative chromatograms. Divided into six chapters, this practical guide covers basic concepts of HPLC; instrumentation; stationary phase materials; eluents; column efficiency; and the influence of physical chemistry on separations. Focusing on the basic considerations such as selection of stationary phase and eluent, rather than specific applications, sections on troubleshooting are also included. Uniquely, the descriptions of chromatographic separations are based on solubility using molecular properties, and solubility parameters are used to analyse the selections of chromatographic mode and column. Presenting the chemistry of liquid chromatography for undergraduate students, this valuable practical guide will also be useful for laboratory staff in industry and academia.
Chapter 1 Basic Concepts of High-performance Liquid Chromatography, 1,
Chapter 2 Instrumentation, 11,
Chapter 3 Preparation, Testing, and Selectivity of Stationary Phase Materials, 31,
Chapter 4 Selection of the Eluent, 57,
Chapter 5 Separation Based on an Improved Column Efficiency, 96,
Chapter 6 Influence of Physical Chemistry on Separations in Liquid Chromatography, 109,
Subject Index, 133,
Basic Concepts of High-performance Liquid Chromatography
The two basic questions in high-performance liquid chromatography focus on (a) how particular compounds can be separated, and (b) why particular compounds were separated by the liquid chromatographic method used. The answers can be obtained by the consideration of some simple representative chromatograms of the separation of well-known compounds. Such separations can be easily understood according to common principles of physics and chemistry.
A separation is described by the following equation, which indicates the degree of resolution between two peaks in a chromatogram, Rs. A complete separation requires Rs > 1.2 units.
Rs = 1/4(α - 1/α)[square root of N]
The resolution can be improved by increasing the column plate number, N, and/ or the separation factor, α(α = the ratio of the retention factors of the two compounds). N is the physical parameter and α is the chemical parameter for the separation. Higher N and α values give a better separation.
The physical and chemical aspects of liquid chromatography, in addition to mechanical aspects, are briefly described in this chapter. Theoretical approaches are explained in detail in later chapters. The effect of stationary phase materials on the chemical selectivity is described in Chapter 3, and the influence of the eluent components is covered in Chapter 4. The plate number theory is discussed in Chapter 5. Quantitative optimization is explained in Chapter 6.
1 Physical Parameters for High-speed Separations
It was thought that high-speed separations would be achieved by the development of a physically stable pumping system and highly sensitive detectors; however, the main contribution to high-speed separation is made by small-size stationary phase materials. A shorter separation time with complete resolution cannot be achieved simply by increasing the flow rate or by using a small column. The theoretical plate number of a small column must be the same as that of a larger column to obtain the same separation.
For example, the separation of a mixture of benzene, acetophenone, toluene, and naphthalene has been completed within 5.5 min using a 15 cm long, 4.6 mm i.d. column, packed with 10 µm porous octadecyl-bonded silica gel, whose theoretical plate number was 38 000 m-1, as shown in Figure 1.1 A. Increasing the flow rate 4-fold reduced the separation time to 1.5 min, because this mixture was well separated (Figure 1.1B). The same mixture was separated within 4.5 min using a 10 cm long, 4.6 mm i.d. column packed with 3 µm octadecyl-bonded porous silica gel with a theoretical plate number of 117 000 m-1 (Figure 1.1C). Doubling the flow rate resulted in completion of the separation within 2 min, as shown (Figure 1.1D).
Comparison of these four chromatograms suggests that a fast separation can be performed either using a longer column with 10 µm stationary phase material with a high flow rate of the eluent, to give high resolution, or by a smaller column packed with 3 µm stationary phase material. However, a high flow rate through the 3 µm stationary phase material is limited by a high column back pressure. The separation could also be completed within 1.2 min on the short column packed with 3 µm stationary phase material by using a stronger eluent, as shown in Figure 1.2. Furthermore, the sensitivity was also improved by using the smaller-size stationary phase material because the sample is less spread out in the eluent and is more concentrated when it reaches the detector. The actual peak height in Figure 1.1C is 1.6 times that in Figure 1.1 A. A small column packed with small particle-size stationary phase materials promises high performance and a high-speed separation both in theory and in practice. The following equation describes the relationship of the column length (L) to the column efficiency: N = L/H. The high plate number N required for good separation is proportional to the longer column length L and small H value. The term H is the height equivalent to a theoretical plate (HETP), which is the length of column needed to generate one theoretical plate. A good column has a high plate number for its length, and, thus, a good column has a low H value. The value of H can also be described by the following equation (which is described in detail in Chapter 5):
[MATHEMATICAL EXPRESSION NOT REPRODUCIBLE IN ASCII]
This equation indicates that the particle size, dp, is the main contributor to the H value. The smaller the particles, the higher the theoretical plate number. The optimum condition is obtained by the relationship between the theoretical plate height and the flow velocity.
2 Physical Considerations
High-speed separations can be achieved with a short column packed with 3 µm stationary phase material, as shown in Figure 1.2. The sensitivity was also improved by the use of smaller-size stationary phase materials, due to less sample diffusion inside the column. The following conditions are required to obtain such a separation.
a. small-diameter, spherical stationary phase materials that have high physical strength;
b. a high pressure pump with controlled flow rate;
c. a system that limits sample diffusion, by considering the column design, using small inner diameter connecting tubing, and a small volume detector flow cell; and
d. a detector and recorder capable of a high-speed response.
The theoretical plate number N of peak B can be calculated from the chromatogram given in Figure 1.3 by the following equation:
N = 16(VR/w)2
where VR is the retention volume and w is the peak width at the base (measured in volume units). However, the retention volume includes the hold-up volume VM (also called dead volume). The hold-up volume is the sum of the void volume of the column (V0 = YA), the volume of the injector (OX) and the volume of the detector and connecting tubing (XY) as shown in Figure 1.3. The actual separation efficiency is defined as the effective theoretical plate number Neff, which excludes the hold-up volume:
Neff = 16(VR - VM/w)2
Commercial instruments have a reasonable balance between the recommended column size and the volume of the column and connecting tubing (XY). However, the theoretical plate number of a single column may give different values on different instruments, and even on replacement of the components and parts of a single instrument. Such discrepancies can be understood in terms of differences in the mechanics of the instruments and the design of their parts.
The normally acceptable extra-column dead volume (OY in Figure 1.3) before there is a significant effect on the...
„Über diesen Titel“ kann sich auf eine andere Ausgabe dieses Titels beziehen.
Allgemeine Geschäftsbedingungen und Kundeninformationen / Datenschutzerklärung
I. Allgemeine Geschäftsbedingungen
§ 1 Grundlegende Bestimmungen
(1) Die nachstehenden Geschäftsbedingungen gelten für alle Verträge, die Sie mit uns als Anbieter (AHA-BUCH GmbH) über die Internetplattformen AbeBooks und/oder ZVAB schließen. Soweit nicht anders vereinbart, wird der Einbeziehung gegebenenfalls von Ihnen verwendeter eigener Bedingungen widersprochen.
(2) Verbraucher im Sinne der nachstehenden Regelungen...
Widerrufsbelehrung/ Muster-Widerrufsformular
Widerrufsrecht für Verbraucher
(Verbraucher ist jede natürliche Person, die ein Rechtsgeschäft zu Zwecken abschließt, die überwiegend weder ihrer gewerblichen noch ihrer selbstständigen beruflichen Tätigkeit zugerechnet werden kann.)
Widerrufsbelehrung
Widerrufsrecht
Sie haben das Recht, binnen vierzehn Tagen ohne Angabe von Gründen diesen Vertrag zu widerrufen.
Die Widerrufsfrist beträgt vierzehn Tage ab dem Tag,
an dem Sie oder ein von Ihnen benannter Dritter, der nicht der Beförderer ist, die Waren in Besitz genommen haben bzw. hat, sofern Sie eine oder mehrere Waren im Rahmen einer einheitlichen Bestellung bestellt haben und diese einheitlich geliefert wird bzw. werden;
an dem Sie oder ein von Ihnen benannter Dritter, der nicht der Beförderer ist, die letzte Ware in Besitz genommen haben bzw. hat, sofern Sie mehrere Waren im Rahmen einer einheitlichen Bestellung bestellt haben und diese getrennt geliefert werden;
an dem Sie oder ein von Ihnen benannter Dritter, der nicht der Beförderer ist, die letzte Teilsendung oder das letzte Stück in Besitz genommen haben bzw. hat, sofern Sie eine Ware bestellt haben, die in mehreren Teilsendungen oder Stücken geliefert wird;
Um Ihr Widerrufsrecht auszuüben, müssen Sie uns (AHA-BUCH GmbH, Garlebsen 48, 37574 Einbeck, Telefonnummer: 05563 9996039, Telefaxnummer: 05563 9995974, E-Mail-Adresse: service@aha-buch.de) mittels einer eindeutigen Erklärung (z.B. ein mit der Post versandter Brief, Telefax oder E-Mail) über Ihren Entschluss, diesen Vertrag zu widerrufen, informieren. Sie können dafür das beigefügte Muster-Widerrufsformular verwenden, das jedoch nicht vorgeschrieben ist.
Zur Wahrung der Widerrufsfrist reicht es aus, dass Sie die Mitteilung über die Ausübung des Widerrufsrechts vor Ablauf der Widerrufsfrist absenden.
Folgen des Widerrufs
Wenn Sie diesen Vertrag widerrufen, haben wir Ihnen alle Zahlungen, die wir von Ihnen erhalten haben, einschließlich der Lieferkosten (mit Ausnahme der zusätzlichen Kosten, die sich daraus ergeben, dass Sie eine andere Art der Lieferung als die von uns angebotene, günstigste Standardlieferung gewählt haben), unverzüglich und spätestens binnen vierzehn Tagen ab dem Tag zurückzuzahlen, an dem die Mitteilung über Ihren Widerruf dieses Vertrags bei uns eingegangen ist. Für diese Rückzahlung verwenden wir dasselbe Zahlungsmittel, das Sie bei der ursprünglichen Transaktion eingesetzt haben, es sei denn, mit Ihnen wurde ausdrücklich etwas anderes vereinbart; in keinem Fall werden Ihnen wegen dieser Rückzahlung Entgelte berechnet.
Wir können die Rückzahlung verweigern, bis wir die Waren wieder zurückerhalten haben oder bis Sie den Nachweis erbracht haben, dass Sie die Waren zurückgesandt haben, je nachdem, welches der frühere Zeitpunkt ist.
Sie haben die Waren unverzüglich und in jedem Fall spätestens binnen vierzehn Tagen ab dem Tag, an dem Sie uns über den Widerruf dieses Vertrags unterrichten, an uns zurückzusenden oder zu übergeben. Die Frist ist gewahrt, wenn Sie die Waren vor Ablauf der Frist von vierzehn Tagen absenden.
Sie tragen die unmittelbaren Kosten der Rücksendung der Waren.
Sie müssen für einen etwaigen Wertverlust der Waren nur aufkommen, wenn dieser Wertverlust auf einen zur Prüfung der Beschaffenheit, Eigenschaften und Funktionsweise der Waren nicht notwendigen Umgang mit ihnen zurückzuführen ist.
Ausschluss- bzw. Erlöschensgründe
Das Widerrufsrecht besteht nicht bei Verträgen
Das Widerrufsrecht erlischt vorzeitig bei Verträgen
Muster-Widerrufsformular
(Wenn Sie den Vertrag widerrufen wollen, dann füllen Sie bitte dieses Formular aus und senden Sie es zurück.)
An AHA-BUCH GmbH, Garlebsen 48, 37574 Einbeck, Telefaxnummer: 05563 9995974, E-Mail-Adresse: service@aha-buch.de :
Hiermit widerrufe(n) ich/ wir () den von mir/ uns () abgeschlossenen Vertrag über den Kauf der folgenden Waren ()/
die Erbringung der folgenden Dienstleistung ()
Bestellt am ()/ erhalten am ()
Name des/ der Verbraucher(s)
Anschrift des/ der Verbraucher(s)
Unterschrift des/ der Verbraucher(s) (nur bei Mitteilung auf Papier)
Datum
(*) Unzutreffendes streichen.
Wir liefern Lagerartikel innerhalb von 24 Stunden nach Erhalt der Bestellung aus.
Barsortimentsartikel, die wir über Nacht geliefert bekommen, am darauffolgenden Werktag.
Unser Ziel ist es Ihnen die Artikel in der ökonomischten und effizientesten Weise zu senden.
| Bestellmenge | 30 bis 40 Werktage | 7 bis 14 Werktage |
|---|---|---|
| Erster Artikel | EUR 61.73 | EUR 71.73 |
Die Versandzeiten werden von den Verkäuferinnen und Verkäufern festgelegt. Sie variieren je nach Versanddienstleister und Standort. Sendungen, die den Zoll passieren, können Verzögerungen unterliegen. Eventuell anfallende Abgaben oder Gebühren sind von der Käuferin bzw. dem Käufer zu tragen. Die Verkäuferin bzw. der Verkäufer kann Sie bezüglich zusätzlicher Versandkosten kontaktieren, um einen möglichen Anstieg der Versandkosten für Ihre Artikel auszugleichen.